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剛果出血熱病毒ELISA檢測試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

克里米亞-剛果出血熱病毒屬于布尼亞（布尼奧羅）病毒科的內(nèi)羅病毒屬。病毒顆粒呈圓形和橢圓形，直徑約85～120納米，外被包膜。光學(xué)鏡下在鼠腦的感染組織中可見到吉姆薩染色呈嗜堿性的有如紅細(xì)胞大小的胞質(zhì)包涵體，而在電鏡下的超薄切片中可辨認(rèn)包涵體所集聚的核糖體樣致密顆粒，這些可能是抗原或病毒亞單位結(jié)構(gòu)。該病毒通過蜱蟲叮咬或在屠宰動物過程中和屠宰后與病毒感染的組織接觸而進(jìn)行傳播。

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基于此原理，Hugh和Leifson提出一種含有低有機(jī)氮的培養(yǎng)基，用以鑒定細(xì)菌從糖類產(chǎn)酸是屬氧化型產(chǎn)酸或發(fā)酵型產(chǎn)酸。這一試驗(yàn)廣泛用于細(xì)菌鑒定。一般用葡萄糖作為糖類代表。也可利用這一基礎(chǔ)培養(yǎng)基來測定細(xì)菌從其他糖類或醇類產(chǎn)酸的能力。

一、Hugh-Leifson培養(yǎng)基組分

蛋白胨                   2g

氯鈉                   5g

磷酸氫二鉀               0.3g

瓊脂                     4g

葡萄糖                   10g

0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液     12mL

蒸餾水                   1000mL

二、配制制法

1、將蛋白胨、氯化鈉和磷酸氫二鉀加水溶解，調(diào)節(jié)pH至7.2。

2、加入葡萄糖、瓊脂煮沸，溶化瓊脂。

3、加入指示劑0.2%溴麝香草酚藍(lán)溶液。

4、混勻后，分裝試管，121℃高壓滅菌15min，直立凝固備用。

三、試驗(yàn)方法

1、細(xì)菌接種 ：以18-24h的幼齡菌種，穿刺接種在上述制備的Hugh-Leifson培養(yǎng)基中，每株菌接4管，其中2管用油封蓋（凡士林和液體石蠟按1:1比例混合后滅菌），也可于接種后滴加溶化的1%瓊脂液于表面進(jìn)行封蓋，約加0.5-1厘米厚，以隔絕空氣為閉管。另2管不封油為開管，同時還要有不接種的閉管作對照。適溫培養(yǎng)1、2、4、7天觀察結(jié)果。

2、結(jié)果觀察：

（1）氧化型產(chǎn)酸：僅開管產(chǎn)酸，氧化作用弱的菌株往往先在上部產(chǎn)堿（1-2天），后來才稍變酸。

（2）發(fā)酵型產(chǎn)酸：開管及閉管均產(chǎn)酸，如產(chǎn)氣，則在瓊脂柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡。

PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常見技術(shù)，也是DNA測序的必須步驟。PCR技術(shù)自出現(xiàn)以來，就被廣泛用于生物學(xué)的各個研究領(lǐng)域，對生物學(xué)的發(fā)展起到了極大的推動作用。然而，相比于其他分子技術(shù)，PCR技術(shù)出現(xiàn)以后發(fā)展緩慢，至今沒有大的改進(jìn)與創(chuàng)新，是高通量測序與規(guī)模化檢測的一個限制因素。