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產(chǎn)品展示
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動物組織和細胞基因組 DNA 提取試劑盒

動物組織和細胞基因組 DNA 提取試劑盒

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動物組織和細胞基因組 DNA 提取試劑盒:產(chǎn)品特點:TM Tissue Genomic DNA Extraction Kit 采用*的疏水膜技術,高效去除組織蛋白等各種干擾物,提取高純度的 DNA。試劑盒采用*的緩沖系統(tǒng),可從多種不同類型動物組織和細胞中快速速提取基因組DNA。

  • 產(chǎn)品描述

動物組織和細胞基因組 DNA 提取試劑盒

Tissue Genomic DNA Extraction Kit

(快速型)(適合從動物組織和細胞中提取基因組 DNA)

 

試劑盒組成 :50 (50 次)

儲存條件:本試劑盒在室溫(15-25 ℃)下可保存一年。

產(chǎn)品特點:TM Tissue Genomic DNA Extraction Kit 采用*的疏水膜技術,高效去除組織蛋白等各種干擾物,提取高純度的 DNA。試劑盒采用*的緩沖系統(tǒng),可從多種不同類型動物組織和細胞中快速速提取基因組DNA。

注意事項:

1.實驗前準備工作:在實驗開始前,詳細閱讀該手冊熟悉各步驟,并準備好所有的試劑盒組分,1.5 ml 和 2 ml 滅菌離心管,以及 37 ℃和 65 ℃ 的溫浴條件。

2.KBL1 和KW1 在低溫時可能產(chǎn)生混濁或沉淀,可在37-50℃溫浴片刻。

3.Buffer KW *次使用前請按瓶上標簽加入 50 ml 無水乙醇。每次使用后,請立即擰緊蓋子。

操作步驟:

(一)平衡吸附柱

1.取一 TM Mini Column 柱裝在一個 2 ml 收集管上(已備)。加入 300 μl Buffer KB 平衡液至柱子內(nèi),室溫 13 000 rpm 離心 1 min,使平衡液*流過柱子。棄收集管中的濾液,將空柱套回收集管內(nèi)。

注意:柱子不平衡,將導致 DNA 產(chǎn)率減少。

(二)樣品處理

2.A. 組織破碎:  可根據(jù)不同樣品選擇以下方法:

1)液氮研磨: 組織直接放入研缽中,加入少量液氮,迅速研磨,待組織變軟,再加少量液氮,再研磨,如此三次,按 5-50 mg 組織/1ml 加入 KBL1,

混勻,靜置 2 min, 轉(zhuǎn)入離心管, 13,000 rpm, 常溫離心,2  min (低溫可能造成

KBL1 結晶,應在 50℃下保持 KBL1 溶解狀態(tài))。

2)直接研磨: 對于新鮮的動物組織, 可以按照 5-50 mg 組織/1ml 加入

KBL1,直接研磨后,轉(zhuǎn)入離心管, 13,000 rpm 常溫離心,2 min。

3)勻漿:組織樣品按每 5-50 mg 組織加入 1 ml KBL1。用電動勻漿器充分勻漿約需 1-2 分鐘。勻漿液轉(zhuǎn)入離心管, 13,000 rpm  常溫離心,2 min。(效果,強烈推薦)

B. 裂解細胞:培養(yǎng)貼壁細胞:不須消化,可直接用 KBL1 進行消化、裂解,KBL1 體積按 10 cm2/ml 比例加入; 懸浮細胞可直接收集、裂解,每1ml KBL1 可裂解 5×106 動物細胞, 裂解液加入后,靜至 2min. 轉(zhuǎn)入離心管, 13,000 rpm 常溫離心,2 min。

注意:基因組 DNA 的純度取決于 KBL1 的體積和標本的量,理論上KBL1 的體積越大,標本的量越少, DNA 質(zhì)量越好! 不同的組織有不同的比例,請在正式實驗前摸索。

(三)吸附

3.將上清液或裂解液轉(zhuǎn)移到已平衡過的吸附柱內(nèi),室溫 13 000 rpm 離心 30 s,使裂解液*流過柱子。保留柱,棄去收集管中的過濾液,將吸附柱重新放入收集管。

注意:1)室溫太低可能造成 KBL1 混濁或沉淀,在 37 ℃溫浴片刻即可。 2)如混合液體積過大,可以分成數(shù)次上柱,每次上樣量不要超過 700 μl。

4.(可選)加入 30 μl  濃度為 20-50 μg/ml 的RNase A  于柱的膜上,37 ℃放置 5-10 min。

注意:本試劑盒沒有配備 RNase A 溶液。一般來說,這一步?jīng)]有必要, 因為本試劑盒的純化柱對 RNA 沒有吸附能力。如果實驗要求不能殘留微量RNA,可采用這一步處理。

(四) 漂洗

5.加入 700 μl Buffer KW1,室溫 13 000 rpm 離心 30 s,棄去收集管中的過濾液,保留柱。

6.加入 700 μl Buffer KW,室溫 13 000 rpm 離心 30 s,棄去收集管中的過濾液,保留柱。

注意:Buffer KW 在*使用之前必須加入 50 ml 無水乙醇,并置于室溫下保存。

7.(可選)重復用 700 μl 70%乙醇(室溫)洗滌柱子。室溫 12 000 rpm

離心 1 min。

8.棄收集管中的濾液,將空柱套回 2 ml 收集管內(nèi)。室溫下,高轉(zhuǎn)速或 13 000 rpm 離心 2 min 以甩干柱子基質(zhì)殘余的液體。

注意:此步驟不可省,否則將導致乙醇殘留于 DNA 中,影響后續(xù)反應。

(五)洗脫

9.把柱子裝在一個新的 1.5 ml 離心管上,加入 50 μl 的 KE(可用滅菌的 TE 10 mM Tris-HCl,pH 8.0 或純水代替,純水可預先用 NaOH 調(diào) pH 值至 8.0),65 ℃放置 5-10 min,13 000 rpm 離心 1 min 以洗脫 DNA。(也可以將 KE 預熱至 65℃,再加至膜上,可以減少放置時間至 1min)

注意:小心加 KE 到柱中吸附膜的中間部位,并確保液體將膜全部覆蓋。

10.DNA 可保存于 4 ℃,若長時間保存,可凍存于-20 ℃。

動物組織和細胞基因組 DNA 提取試劑盒

血液基因組DNA提取試劑盒
細菌(G-)基因組DNA提取試劑盒
微生物基因組DNA提取試劑盒
植物基因組DNA提取試劑盒
特殊植物基因組DNA提取試劑盒
土壤總DNA提取試劑盒
糞便總DNA提取試劑盒
食品總DNA提取試劑盒
總RNA提取試劑盒

德國Qiagen部分提取試劑盒

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74904RNeasy Plant Mini Kit (50)
75142RNeasy Midi Kit (10)
75144RNeasy Midi Kit (50)
75162RNeasy Maxi Kit (12)
76064exoEasy Maxi Kit(20)
76104RNAlater (50ml)
76106RNAlater (250ml)
761115PAXgene Blood DNA Tube (100)
761133PAXgene Blood DNA Kit (25)
76154RNAlater TissueProtect Tubes (50x1,5ml)

 

 

由于版面有限,先了解更多關于產(chǎn)品信息,請致電:020-8257 4011或添加Q:30128 18662 聯(lián)系。

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