植物基因組DNA提取試劑盒
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植物基因組DNA提取試劑盒：TM Plant Genomic DNA Extraction Kit 采用*的疏水膜技術(shù)，*去除植物組織細胞中蛋白和大部分 RNA 等各種干擾物，提取高純度的DNA。試劑盒采用*的緩沖系統(tǒng)，可從絕大多數(shù)不同類型的植物包括水稻，小麥，玉米，擬南芥和大豆等植物中快速提取基因組 DNA。一般情況下，100 mg 新鮮組織的基因組 DNA 產(chǎn)量可達 5-30 μg。
- 產(chǎn)品描述
植物基因組 DNA 提取試劑盒
（Plant Genomic DNA Extraction Kit）
（適合從植物組織中提取基因組 DNA ）
試劑盒組成 50 (50 次)
Plant Genomic DNA Extraction Ki 50
2 ml Collection Tube 50
Buffer KB (Column solution) 15 ml
Buffer KBL1 (Lysis solution) 2×30 ml
Buffer KW1(Wash solution ) 50 ml
Buffer KW (Wash solution ) 使用前加入 50 mL 無水 乙醇
Buffer KE (Elution solution) 15 ml
儲存條件
本試劑盒在室溫（15-25 ℃）下可保存一年。
產(chǎn)品特點：
TM Plant Genomic DNA Extraction Kit 采用*的疏水膜技術(shù)，*去除植物組織細胞中蛋白和大部分 RNA 等各種干擾物，提取高純度的DNA。試劑盒采用*的緩沖系統(tǒng)，可從絕大多數(shù)不同類型的植物包括水稻，小麥，玉米，擬南芥和大豆等植物中快速提取基因組 DNA。一般情況下，100 mg 新鮮組織的基因組 DNA 產(chǎn)量可達 5-30 μg。本試劑盒不適宜從棉花，煙草，油菜等富含多酚多糖類植物中提取總 DNA，多酚多糖類植物的提取可選用其他試劑盒 。
注意事項：
1.實驗前準備工作 ：詳細閱讀該手冊熟悉各步驟，并準備好所有的試劑盒組分、研缽、研棒、藥匙、1.5 ml 和 2 ml 滅菌離心管以及 37 ℃和 65 ℃的溫浴條件。
2.2. KBL1 和 KW1 在低溫時可能產(chǎn)生混濁或沉淀，在 37-65 ℃溫浴片刻即可。
3. Buffer KW *次使用前請按瓶上標簽加入 50 ml 無水乙醇。每次使用后，請立即擰緊蓋子。
操作步驟：
（ 一） 平衡吸附柱
1. 取一TM Mini Column 柱裝在一個 2 ml 收集管上（已備）。加入 300 μl Buffer KB 平衡液至柱子內(nèi)，室溫 13 000 rpm 離心 1 min，使平衡液*流過柱子。棄收集管中的濾液，將空柱套回收集管內(nèi)。
注意：柱子不平衡，將導(dǎo)致 DNA 產(chǎn)率減少。
（ 二 ）樣品處理
2. 組織破碎：可根據(jù)不同樣品研磨難易程度選擇以下方法：
1）液氮研磨：將 50-100 mg 組織直接放入研缽，加入少量液氮，迅速研磨，再加少量液氮，再研磨，如此三次，將樣品研成粉末。用藥匙迅速將樣品干粉按 100 mg 組織/1000 μl KBL1 的比例加入一新的 2 ml 離心管中。加入 KBL1 后，震蕩混勻。室溫 13 000 rpm 離心 2 min。
2）直接研磨：對于新鮮植物組織，將 50-100 mg 組織直接放入研缽，按 100 mg 組織/1000 μl KBL1 比例加入 KBL1，直接在 KBL1 中將樣品研磨勻漿后，轉(zhuǎn)入 1.5 ml 離心管） （推薦）。室溫 13 000 rpm 離心 5 min。棄去沉淀，上清液待轉(zhuǎn)移。
注意：
1 ）的 上述的推薦體積為使用的 KBL1 的小體積比例。 基因組DNA 的純度取決于 KBL1 的體積和標本的量，理論上 KBL1 的體積越大，
樣 本的量越少， DNA 質(zhì)量越好！ 不同的植物組織有不同的比例，請在正式實驗前摸索。
2 ）盡量使用新鮮樣品，或者樣品取得后立即直接保存于液氮或者
-70 ℃。
（三 ）吸附
3.將上清液轉(zhuǎn)移到平衡過的吸附柱內(nèi)，室溫 13 000 rpm 離心 30 s，使裂解液*流過柱子。棄去收集管中的過濾液，把柱套回收集管中。
4.注意：
1 ）室溫太低可能造成 KBL1 混濁或沉淀，在 37 ℃ 溫浴片刻即可。
2 ）如上清液 體積過大，可以分成數(shù)次上柱，每次 不要超過 700 μl。
4. ）（可選）加入 30 μl 濃度為 20-50 μg/ml 的 RNase A 于柱的膜上，37 ℃放置 5-10 min。
注 意：本試劑盒沒有配備 RNase A 溶液。一般來說，這一步?jīng)]有必要，因?qū)?為本試劑盒的純化柱對 RNA 沒有吸附能力。如果實驗要求不能殘留微量RNA ，可采用這一步處理 。
( 四 ) 漂洗
5. 加入 700 μl Buffer KW1，室溫 13 000 rpm 離心 30 s，棄去收集管中的過濾液，保留柱。
6. 加入 700 μl Buffer KW，室溫 13 000 rpm 離心 30 s，棄去收集管中的過濾液，保留柱。 注意：Buffer KW 在*使用之前必須加入 50 ml 無水或95% 乙醇，并置于室溫下保存。
7. （可選）重復(fù)用 700 μl 70%乙醇（室溫）洗滌柱子，室溫 13 000 rpm離心 1 min。（注意：用 70%乙醇漂洗有利于提高 DNA 純度）
8. 棄去收集管中的濾液，將空柱套回收集管內(nèi)。室溫下，13 000 rpm 離心 2 min 以甩干柱子基質(zhì)殘余的液體。
注意： 此步驟不可省，否則 將導(dǎo)致乙醇殘留于 DNA 中 ，影響后續(xù)反應(yīng)。
( 五) ) 洗 脫
9. 把柱子裝在一個新的 1.5 ml 離心管上，加入 50 μl 的 KE（可用滅菌的 TE 10 mM Tris-HCl，pH 8.0 或純水代替，純水可預(yù)先用 NaOH 調(diào) pH 值至 8.0），65 ℃放置 5-10 min，13 000 rpm 離心 1 min 以洗脫 DNA。 （也可以將 KE 預(yù)熱至 65 ℃ ，再加至膜上，可以減少放置時間至 1min ）注意：小心加 KE 到柱 中吸附膜的中間部位， 并 確保 液體 將膜全部覆蓋。
10 ．DNA 應(yīng)保存于 4 ℃，若長時間保存，可凍存于-20 ℃。
本司部分DNA提取試劑盒，致電：020-8257 4011楊永漢
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