手足口IgM抗體快速檢測卡

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安裝印跡裝置
1）切一張啱大細嘅帶正電荷尼龍膜。用鉛筆標上表示方向嘅記認。用水將膜簡單濕到。，喺二十×SSC中室溫溝1 h。
2）喺膜浸泡期間呢，先用0.1 mol/L NaOH小心清洗印跡裝置，而且用無菌水洗干凈。
3）將兩片厚濾紙用二十×SSC浸濕，再擺真空器頂部。
4）將樣品槽插入裝置嘅上部，將濕尼龍膜擺喺樣品槽加樣窿嘅篤，用管啊喺膜表面嘅滾動以抹得甩膜與裝置夾層中嘅氣泡。
5）加緊夾板，鏈接真空理。
6）加10×SSC直至液面冇過尼龍膜，關(guān)掉真空，而且用10×SSC充滿。
2. RNA樣品準備
1）將個個RNA樣品（溶解喺十μl水）勒分別與30μl RNA變性液撈。
2）65℃溫育5 min，然后喺雪上冷卻。
3）向個個樣品中加等體積二十×SSC。
4）細仔向印跡裝置中吸入10×SSC，直到淹沒尼龍膜。
3. RNA樣品嘅印跡同RNA喺膜上嘅入墻
1）將所有樣品細仔加狹線中，然后細仔吸干膜。做所有樣品都鋪到膜上后，個個狹線用一ml 10×SSC洗兩次。
2）當?shù)诙喯茨ね瓿珊?，繼續(xù)細仔吸干膜。
3）改下膜，用紫之外，交聯(lián)、煨或者個照射將RNA入墻喺膜上。
4.入墻化RNA嘅雜交與洗膜
1）將膜放入烤盤或者雜交爐中，加10~20 ml預(yù)雜交液68℃溫育2 h。
2）將已變性嘅核衰變識認嘅探針直接加到預(yù)雜交液中。喺適當嘅溫度下繼續(xù)溫育12～16 h。
3）雜交完之后就由膠袋中拎出膜，然后盡可能快噉將膜轉(zhuǎn)移到室溫下裝有100～200 ml、1×SSC（0.1% SDS）嘅膠容器中。打緊膠容器，擺搖床上輕搖10 min。
4）將膜轉(zhuǎn)移到另一個裝有100～200 ml、預(yù)熱到68℃嘅0.5×SSC（含0.1% SDS）嘅膠袋中，然后喺度溫度下輕搖10 min。

前轍下
1）切一張可大小之持正電荷尼龍膜。以鉛筆標上表向之記。以水膜簡濡，在二十×SSC中室溫泡一？。
二）在膜漬中，先用。.一mol /孔NaOH慎洗轍下，用水洗凈無菌。
三）把兩片厚濾紙用那×SSC濕，復(fù)于真空器頂。
四）以漕入置之上，，以濕尼龍膜置樣槽加如孔之底，以吸管于膜之外轉(zhuǎn)以去膜與置夾層中之氣泡。
五）急板，接真空管。
六）入十×SSC至液面無尼龍膜，闔真空，用SSC滿十×。
河南.RNA樣備
1）把各樣RNA（俱在十μ？水）分與三十μRNA變性液混合。。
二）六十五真溫育五min，而于冰冷。
三）向每樣中入等積二十×SSC。
四）輕輕向轍為中SSC欣欣十×，至于沒尼龍膜。
三.RNA樣之轍、RNA于膜上之定
1）盡，輕入狹線中，然后輕輕盡膜。當諸樣都鋪至膜上后，每隘線以一ml十×SSC洗二次。
二）當再洗膜畢，又輕盡膜。
三）取膜，以紫外交聯(lián)、炙或微波照以RNA定于膜上。
四.成化RNA之耳膜與洗
1）以膜入烤盤或耳爐中，入十腮二十ml預(yù)耳68真液溫育二？。
二）以已變性之放射性表之探針直加預(yù)耳液中。于適中之溫度下繼溫育十二～十六？。
三）耳畢自塑料袋中取膜，然后盡可遽以膜移室溫下有百～二百ml、一×SSC（。.1% SDS）之塑料豆。蓋緊塑料器，于搖床上輕搖十min。
四）以膜移一貯百～二百ml、預(yù)熱至68真也。.五×SSC（含。.1% SDS）之塑料囊，然后先溫下輕搖十min。