貝納特氏立克次體IGG/IGM抗體ELISA試劑盒

產品名稱：貝納特氏立克次體IGG/IGM抗體ELISA試劑盒，間接免疫酶法檢測IgG和IgM抗體在人血清/血漿的克氏錐蟲。96T

簡介：Q熱是由貝納特氏立克次體引起的全身性疾病，可發(fā)熱、非典型肺炎、肝炎或心內膜炎。診斷是基于血清學方法，因為從臨床樣本分離是困難的。C. burnetii表示，I期抗原時分離出的人類和動物、二期抗原時分離出的細胞培養(yǎng)。
II期抗原抗體在疾病的急性期占優(yōu)勢。常用的檢測方法有補體結合（CF）、間接免疫熒光法（IFA）和elisa。后4-8周，IgG抗體水平檢測的zui大。IgM抗體出現(xiàn)后的第二周開始直到疾病的急性期第四個月。在這些情況下，急性感染，IgG抗體在高滴度檢測，發(fā)現(xiàn)IgM也是極有可能的。在慢性期（心內膜炎），IgM是不可檢測的。ELISA檢測具有特異性強、敏感性好等優(yōu)點，人類q熱篩查及診斷試驗對流行病學研究具有重要意義。
 

測試原理：

酶聯(lián)免疫吸附試驗方法是基于在聚苯乙烯表面吸附抗原測試的抗體反應。未結合的免疫球蛋白被洗掉。一種標記為抗人球蛋白的酶在第二步結合抗原抗體復合物。一個新的洗滌步驟后，結合共軛與底物溶液開發(fā)援助（TMB）呈現(xiàn)藍色的水溶性產品變成黃色加酸終止液后。

試劑盒的特點：

除洗滌液外，所有試劑都已備好使用。

血清稀釋液和結合物染色有助于該技術的性能。

樣品預稀釋是不必要的。

試劑盒內容：

1 立克次體板: 1 96-wells plate coated with LPS antigen of Brucella abortus,strain S-99.

2 血清稀釋液: 25 ml of serum dilution solution: a blue coloured phosphate buffer containing protein stabilizers and Neolone and Bronidox. Ready to use.

3 IgG/IgM 陽性對照: 500 µl of positive control serum containing Neolone and Bronidox.

4 IgG/IgM 切斷質控品: 500 µl of cut off control serum containing Neolone and Bronidox.

5 IgG/IgM 陰性對照: 500 µl of negative control serum containing Neolone and Bronidox.

6 IgG/IgM 共軛: 15 ml of anti-human IgG peroxidase conjugate dilution in an orange-coloured Neolone and Bronidox-containing buffer. Ready to use.

7 TMB 底物溶液: 15 ml of substrate solution containing tetramethylbenzidine (TMB). Ready to use.

8 停止劑: 15 ml of stopping solution: 0.5 M sulphuric acid.

9 洗滌緩沖液: 50 ml of 20x washing solution: a phosphate buffer containing Tween R -20 and Proclin.

存儲要求：

存儲在2-8ºC和注意到期日期。

所需材料，但不提供：

-高精度微量5和100µL.

-八通道微電極100µL.

-ELISA板式洗滌器。

- 經恒溫處理孵化器/水浴。

-ELISA板分光光度計，450納米測量濾波器和620納米參考濾光片。

或者，一種ELISA自動處理器及蒸餾水。

試劑的穩(wěn)定性和操作：

在無菌條件下處理試劑以避免微生物污染物。

洗滌和加藥之間不要讓盤子干燥。

底物溶液對光敏感，請避免光照。如果在儲存期間變藍請丟棄。底物溶液不應與氧化劑如漂白劑或金屬接觸。確保沒有金屬部件與基體接觸。

只使用洗滌量，血清稀釋度，共軛和TMB溶液測試所需。不要把多余的溶液倒進瓶子里。

標本采集與處理：

無菌采集血液必須使用靜脈穿刺技術人才。無菌或無菌技術的使用將保持標本的完整性。

血清/血漿樣品被冷藏（2-8ºC）在收集或冷凍（20ºC）如果在7天內完成測試，不能。樣品不應反復冷凍和解凍。不要使用高脂血、溶血、污染樣本。含有顆粒的樣品應通過離心澄清。該試劑盒適合于血清或血漿使用。

局限性：

1、此試劑盒用于與人血清/血漿結合使用。

2、該工具包的用戶建議仔細閱讀和理解包插入。為了獲得可靠的測試結果，必須嚴格遵守該協(xié)議。特別是，正確的樣品和試劑的加樣，隨著孵育步驟仔細清洗和時機是*的準確的結果。

3、樣品的結果應與臨床評價和其他診斷程序結合使用。隔離技術應作出明確診斷。

4、此測試不會顯示感染部位。它并不打算取代孤立。

5、抗體水平的顯著升高并不排除感染可能性。

6、在感染過程中很早采集的樣本可能沒有檢測到IgG水平。在這種情況下，建議進行IgM檢測，或第二次血清樣本，14至21天后，與原樣品平行測試，以確定血清轉換。

7、由于孕婦IgG在分娩前被動地從母體傳遞到胎兒，因此必須謹慎地對其進行檢測。IgM檢測通常是6個月以下兒童感染的有用指標。

8、單一樣本抗體測定結果不應用于診斷zui近感染。配對樣本（急性期和恢復期）應同時進行檢測，以尋找血清轉換或抗體水平顯著上升。

貝納特氏立克次體IGG/IGM抗體ELISA試劑盒

更多詳細說明及原版英文說明書請工作人員。

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